Методы диагностики хеликобактер пилори: анализ крови на антитела, анализ кала методом пцр, уреазные тесты (при фгдс, дыхательный), биопсия с цитологией. Как сдавать анализ кала на хеликобактер пилори

Проблемы в желудочно-кишечном тракте доставляют дискомфорт, мешают жить привычной жизнью. Болезненные спазмы, тошнота, тяжесть, отрыжка – симптомы, разрушающие любые планы, выбивающие из колеи. Виновник проявлений – бактерия хеликобактер пилори, способная поражать слизистую оболочку внутренних органов.

По сравнению с аналогичными бактериями, хеликобактерия пилори комфортно себя чувствует в кислой среде. Поэтому желудок является для нее любимым местом пребывания. Вращающиеся жгутики и форма спирали позволяют элементам передвигаться по густой слизистой.

При неблагоприятных условиях бактерии принимают форму круга и затихают в организме.

Анализ кала на хеликобактер проводится такими методами как: ПЦР, культуральный, иммунологический. Точность ПЦР – до 95%. Это самый простой вид диагностики, рекомендуемый детям, больным в тяжелом состоянии, пожилым.

Анализ с помощью ПЦР

Провоцирующие факторы

100% показание для анализа – язва желудка и 12-типерстной кишки. Помимо этого, назначают подобную диагностику в следующих случаях:

• онкология;
• лимфома желудка;
• атрофический, хеликобактерный гастрит;
• дисплазия части пищеварительного тракта;
• рак желудка в анамнезе (первая линия);
• болезнь Менетрие;
• диспепсия дольше 6 месяцев;
• длительное употребление ингибиторов протонной помпы;
• заболевания крови.

Симптомы при наличии хеликобактерной инфекции

Признаки наличия бактерии могут проявиться не сразу. Развитию заболевания способствуют такие факторы как:

• несбалансированное питание;
• стрессовые ситуации;
• низкий иммунитет.

Инфицирование происходит через еду, жидкость, при контакте с больным (чихание, кашель). Если хеликобактер пилори активизировалась, то человек ощущает тошноту, изжогу, присутствует плохой аппетит, тяжесть после принятия пищи, неприятный запах из ротовой полости.

Один из признаков заражения хеликобактерией — неприятный запах изо рта

Симптомы похожи на проявления гастрита, поэтому для обнаружения пилори важно пройти обследование, сдать анализы.

Подготовка к сдаче материала

За 30 дней до исследования нежелательно пить синтетические препараты и лекарства, стимулирующие сокращение стенок желудка. Помимо этого, за 3-е суток до забора материала рекомендуется не употреблять в пищу красящие продукты (красное вино, свекла, черная смородина).

Также не стоит есть морковь, капусту, отруби, поскольку в них содержится грубая клетчатка.

Кал собирается в специальную тару для анализов. Ее можно приобрести в аптеке. Фекалии должны заполнить треть контейнера, этого будет достаточно для исследования. Нельзя брать испражнения из унитаза, поскольку в него могут попасть дезинфицирующие средства.

Экскременты должны быть доставлены в лабораторию как можно быстрей (в ближайшие два часа). Хранить их можно до 12 часов при температуре от -8°С до +2°С.

Культуральный метод

Бактерия в виде спирали в экскрементах почти никогда не встречается. Испражнения являются неподходящей средой для вредного микроба. Попадая в толстый кишечник, пилори принимает форму круга. В кале изредка она наблюдается именно в этом виде.

Культуральный тип исследования – посев кала на комфортную среду для дальнейшего размножения хеликобактер пилори. Далее колонии растут, изучаются лаборантами, окрашиваются химическими препаратами и отправляются на исследование под микроскоп. Подобные манипуляции позволяют выращивать патогенные микроорганизмы, анализировать их.

Помимо обнаружения пилори, метод способен установить чувствительность инфекции к определенному лекарству. Если в процессе исследования к бактерии добавить антибактериальное средство и рост колоний останется прежним, то можно говорить об устойчивости. При гибели микроорганизмов имеет смысл прописать данный медикамент человеку для лечения.

Действие будет верным в случае обнаружения спиралевидной формы хеликобактер пилори. Культуральное исследование не имеет популярности по таким причинам, как:

Иммунологический метод

Испражнения человека подвергаются исследованию, позволяющему выявить антитела хеликобактер пилори. Для этого берутся определенные белковые соединения, способные обнаруживать чужеродный антиген. Могут быть найдены части хеликобактер пилори, продукты ее жизнедеятельности.

При взаимодействии с антигеном, антитела бактерии создают свой комплекс. Именно его и определяет иммунологический способ. Подобный разбор микробов в РФ проводится редко, хотя лаборатории оснащены всем необходимым.

ПЦР

Популярный способ выявления хеликобактер пилори в экскрементах. Точность высокая, поэтому во всех клиниках используют практически только его. Процесс анализа заключается в выделении участка ДНК бактерии из испражнений. После этого выделенная часть дублируется на аппарате, восстанавливающем генетический код.

При достижении нужных размеров, остаток бактерии сравнивают с эталоном, определяют хеликобактер пилори. Положительный ПЦР – знак присутствия бактерии в кишечнике, части ДНК совпали с оригиналом.

Достоверность анализов

ПЦР является самым достоверным методом распознавания бактерий из трех описанных. В некоторых случаях он уступает эндоскопии и биопсии. Цепная реакция редко дает ложноположительный ответ, имеет высокую специфичность. Кроме того, метод позволяет исследовать кокковые формы хеликобактер пилори.

На заметку! Культуральный и иммунологический методы менее достоверны, чем ПЦР. Причина в частых ложноположительных ответах. Но если их применять в совокупности с аналогичными исследованиями, то они будут хорошим подспорьем для установления диагноза.

Расшифровка

Если кал исследуется методом цепной реакции, результат будет отрицательный или положительный. Соответственно, в первом случае не будет выявлено бактерий в испражнениях, во втором – обнаружена специфичная молекула хеликобактер пилори.

Анализ на посев биоматериала подразумевает оценку качества и количества микроорганизмов в специфичной среде.

Рост бактерий имеет 4 ступени

1. Подходящая, водянистая среда. Незначительный рост микробов. Твердая среда – организмов нет в поле зрения.
2. Определенный тип бактерий может расходиться до десяти колоний.
3. Твердая среда. Значительное разрастание пилори.
4. Рост бактерий создает более ста колоний.

3 и 4 степени говорят о воспалении, которое спровоцировала определенная бактерия.

Если в кале обнаруживается хеликобактер пилори, это не означает, что есть язва или подобные заболевания. Определяется лишь наличие возбудителя болезни. При обильном заселении слизистой желудка хеликобактер пилори, можно говорить о гастрите, язвенной болезни, панкреатите.

После указания степени пишется зараженность, обозначаемая плюсами:

• + количество бактерий менее 20 в поле зрения;
• ++ не более 50;
• +++ показывают более 50 бактерий.

Таблица. Степень зараженности

На результаты анализов влияет множество факторов, включая подготовку к исследованию, время хранения материала до отправки в лабораторию. Чтобы получить максимально достоверный ответ, важно соблюдать все предписания и рекомендации врача.

Видео – Анализ кала на хеликобактер

Сдавать анализ на хеликобактер пилори можно несколькими способами: сдать кровь или кал на анализ, провести дыхательный тест. Нужна тщательная подготовка.

Иногда человек может и не подозревать, что в его организме уже обитают эти бактерии, пока толчком к развитию заболеваний не станут стрессы, неправильное питание, злоупотребление спиртным, курение и т.д. Согласно статистике, более 70% людей старше 40 лет являются носителями хеликобактер пилори, но у инфицированных не наблюдаются симптомы заболеваний.

Если же человек ослаблен, то бактерии начинают стремительно размножаться, выделяют токсины, которые, накапливаясь в большом количестве, поражают слизистую оболочку внутренних органов. Сначала появляются воспаления. Если ничего не делать, вскоре возникнут эрозии или язвы, могут дать о себе знать и опухоли.

Анализ на хеликобактер пилори может сдать любой желающий, но врачи назначают его тем, кто уже страдает от язвы желудка или двенадцатиперстной кишки, гастрита или же, если эти бактерии были найдены у одного из членов семьи (проживающим вместе с ними), или же у близкого родственника выявили рак желудка.

Также лечащего врача могут насторожить следующие симптомы, при наличии которых от попросит сдать анализ на хеликобактер:

1. Пациент мучается от тяжести в желудке.
2. Ему тяжело усваивать белковую пищу, т.е. есть мясо.
3. У него появилась изжога, метеоризм, отрыжка, часто тошнит, рвет.
4. Болит желудок, боли стихают, если человек поел.
5. Пациент жалуется на нарушение аппетита или же на затрудненное глотание.
6. Человек сильно похудел.
7. У него постоянные запоры или же понос.

Как сдавать анализы

Вы решили сдать анализ на наличие бактерий Хеликобактер пилори. Как это сделать, как подготовиться к анализу?

Прежде всего, нужно знать, что есть несколько способов это сделать, и лучше надеяться не на один из них, а провести хотя бы 2 исследования.

Расскажем о каждом виде обследования и о подготовке к нему.

Читайте также по теме

Анализ на австралийский антиген. Как сдавать? Норма. Расшифровка

Анализ крови

Врач может попросить вас сдать анализ крови, чтобы посмотреть, есть ли в ней антитела к хеликобактер пилори.

Наш организм борется с инфекцией и вырабатывает специальные антитела, которые связываются с возбудителем болезни, чтобы нейтрализовать его. Если в крови пациента есть эти антитела, то можно говорить о том, что он заражен. Анализ крови сдается утром, кровь собирают из локтевой вены.

Подготовка к нему стандартная, но все же не мешает о ней напомнить:

1. Нельзя принимать лекарства и употреблять спиртные напитки за 2 дня до сдачи анализов.
2. Перед тем, как идти в лабораторию, нельзя заниматься спортом или ходить в баню.
3. Перед сдачей анализа не стоит есть жирные и острые продукты.
4. Нужно избегать стрессов, беречь себя, не нервничать.
5. Кровь на анализ хеликобактер пилори надо сдавать натощак, т.е. последний прием пищи должен быть накануне вечером. Утром нельзя завтракать, даже пить сок, кофе или чай, а также курить.

Уреазный дыхательный тест

Бактерия Хеликобактер пилори синтезирует уреазу, это особый фермент. Он может влиять на мочевину, расщепляя ее на углекислый и аммиак в отделах кишечника. Проводя исследование, смотрят, какая концентрация этих веществ в выдыхаемом воздухе до приема мочевины и после нее. Расскажем более подробно, как проводится дыхательный тест на хеликобактер пилори.

Сначала пациент дышит через специальную трубку. Не стоит волноваться и переживать, дыхание должно быть таким же, как и в обычной жизни. После того, как были получены результаты, человеку предлагают выпить раствор карбамида (5%). Необходимо подождать 5 минут, а потом снова взять пробу.

Чтобы определить, заражен человек или нет, необходимо проверить концентрацию аммиака в выдыхаемом воздухе. Если она достаточно высокая (более 0,5 мг/мл), то тест – положительный. Чтобы тест был правильным, в трубку не должна попадать слюна. Если не получается ее сглатывать, то можно иногда вытаскивать трубку.

В случае попадании слюны придется повторить обследование.

Как подготовиться к исследованию:

1. Нельзя принимать препараты, которые понижают кислотность желудочного сока. Стоит от них отказаться за 3 недели до обследования. Это антацидные средства, антибиотики и т.д.
2. На время придется забыть об алкогольных напитках. Не стоит их принимать как минимум за 3 дня до обследования.
3. За день до того, как вы пойдете сдавать анализ, нельзя есть продукты, которые способствуют газообразованию: черный хлеб, капусту, горох, картошку и т.д.
4. Проходить тест надо натощак, перед этим ужинать легкой пищей.
5. До того, как обследоваться, т.е. утром, нельзя курить и завтракать.
6. За сутки не жевать жевательную резинку, которая способствует сильному слюноотделению.

Как мы видим, подготовка к тесту не сложная, но ее лучше начать заранее.

Анализ кала

Чтобы определить, есть ли в организме бактерии хеликобактер пилори, можно сдать анализ кала. Перед тем, как сдавать кал на анализ, за 3 дня до того, как вы будете собирать материал, необходимо отказаться от красящих веществ и пищевых волокон, нельзя принимать лекарства от запора.

Современные диагностические методы позволяют узнать многое о состоянии здоровья человека по его биологическим жидкостям: крови, моче, фекалиям.

Исследуя кал, можно узнать, поселилась ли в организме , способная вызывать гастриты, и провоцировать онкопатологию.

Кал на наличие или отсутствие данного микроба можно изучать тремя способами: культуральным, иммунологическим, и наиболее достоверным и распространённым – методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

Сама бактерия крайне редко встречается в фекалиях в своей привычной S-образной форме целиком. Толстый кишечник и каловые массы не являются благоприятной средой для микроорганизма, поэтому, попадая в них, она может принимать круглую кокковую форму, изредка встречаясь в испражнениях именно в таком виде.

Культуральный метод подразумевает под собой посев части исследуемого материала на питательную среду, в которой бактерия будет хорошо себя чувствовать и начнёт размножаться.

Таким образом:

Происходит рост колоний, которые анализируются, окрашиваются специальными реактивами и исследуются под микроскопом. Данным способом в прямом смысле выращивают патогенные микробы с целью их дальнейшего изучения.

Кроме обнаружения самой бактерии, метод позволяет установить чувствительность патогена к тому или иному антибиотику. Если при добавлении лекарственного препарата рост колонии сохраняется – Н.руlori устойчива к антибактериальному средству, а если микроорганизмы погибают – имеет смысл назначить данный препарат пациенту с целью лечения и эрадикации, бактерии чувствительны к нему.

Культуральный способ весьма достоверен, но только в том случае, если во взятом биологическом материале обнаружена S-форма микроба. Метод имеет свои недостатки, и по этой причине не слишком распространён:

• Сроки исследования занимают от 6 до 12 дней
• Дорогостоящие среды для высевания хеликобактерий
• Специфические условия для сред, обеспечивающие рост колонии, которые сложно воспроизвести в лаборатории
• Редкая встречаемость S-образных форм бактерии в испражнениях, пригодных для роста в питательных условиях (кокковые формы не исследуют)

Определение антигена хеликобактер пилори в кале иммунологическим методом

Фекалии пациента могут быть подвергнуты иммунологическому исследованию, которое позволяет выявить уже не сам микроорганизм, а его части – антигены.

Для этого:

Используются специальные антитела, направленные на обнаружение чужеродного антигена – частей бактерии, продуктов её жизнедеятельности, генетического материала.

Взаимодействуя с чужеродным агентом, антитела образуют специфический комплекс, который и определяется иммуно-ферментным анализом.

Данный способ изучения кала редко применяется в России, не многие лаборатории оснащены необходимыми реактивами и необходимыми тестами.

Но в перспективе возможно включение данного способа обнаружения хеликобактер в качестве скрининг-тестов: исследования широких групп населения на заражённость бактерией.

Анализ кала ПЦР на хеликобактер пилори

Это наиболее распространённый метод исследования фекалий на данную бактерию, обладающий высокой точностью.

Суть способа в следующем:

Из биологического материала пациента выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно искусственно дублируется на специальном аппарате, так происходит восстановление гететического кода Н.руlori

Когда геномный фрагмент микроба достигает достаточных размеров, его сравнивают с эталонным и делают вывод об исследуемом микроорганизме: хеликобактер ли это или другой патоген.

Положительный ПЦР анализ означает наличие в организме человека хеликобактерной инфекции: бактерия присутствует в желудке, ее фрагменты ДНК обнаружены в кале и совпали с эталонными.

Достоинства ПЦР-метода:

• Высокая точность: даже незначительного количества генетического материала достаточно для исследования с большим процентом достоверности, приближающимся к 99%.
• Быстрота исследования. 2 суток достаточно для анализа, но существуют экспресс-способы, позволяющие установить диагноз за несколько часов.
• Безболезненность. Способ атравматичен, неинвазивен. Позволяет обследовать маленьких детей, пожилых, ослабленных пациентов, которым противопоказана ФГДС с биопсией и другие эндоскопические манипуляции.
• Для точного результата не обязательно обнаружение ДНК-фрагментов именно S или спиралевидных форм, части кокковых микробов (наиболее встречающихся в испражнениях) тоже подходят для анализа.

У ПЦР-диагностики значительно больше плюсов, чем минусов. К недостаткам можно отнести:

• Относительно высокую стоимость анализа.
• Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
• Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори инвитро

Все диагностические исследования, проводимые с фекалиями пациента, относятся к манипуляциям ин витро – «в пробирке», «в стекле», вне организма человека.

Они обладают достаточно высокой точностью и информативностью, если преследуют цель обнаружения микроба.

Но не все процессы, происходящие «ин виво» — внутри человеческого организма, можно с той же достоверностью воссоздать «ин витро». К примеру, определение чувствительности к антибиотикам, анализируемую культуральным методом.

При исследовании антибактериальной чувствительности колоний микробов на питательных культурах, было выявлено, что самые подходящие препараты для бактерий ин витро, «не работали», оказывались малоэффективными при лечении пациента.

Результаты исследований чувствительности бактерии к антибиотикам «в пробирке» не всегда точны.

Как сдать анализ кала на хеликобактер пилори

Достоверность анализа кала на хеликобактер

ПЦР — диагностика фекалий наиболее достоверна из всех трех вышеописанных способов, она в какой-то степени уступает лишь биопсийному эндоскопическому исследованию.

ПЦР-анализ кала редко дает ложноположительные результаты, обладает высокой специфичностью, позволяет исследовать ДНК-материал часто встречаемых кокковых форм хеликобактерий в испражнениях.

Достоверность культурального и иммунологического метода ниже, чем ПЦР. Эти методы «грешат» появлением ложноположительных результатов, но в совокупности с другими способами выявления Helicobacter pylori, они являются прекрасным подспорьем для постановки диагноза.

Антиген H.pylori в фекалиях

В случае, если в кале обнаружен антиген хеликобактер пилори либо ДНК-фрагмент исследуемого микроорганизма, это означает, что:

• Человек инфицирован Н.руlori.
• Эрадикационная терапия недостаточно эффективна и микроб не исчез из слизистой оболочки ЖКТ.
• Прошло меньше месяца после терапии и в кале сохраняются антигены умертвлённых патогенов.

Чтобы исключить ложноположительный результат после прохождения схемы антихеликобактерной терапии (когда анализ положительный, а организм человека не содержит Н.рylori), следует не торопиться узнавать эффективность лечения, а выждать не менее одного месяца после его окончания.

Если проведено успешно, спустя 1 месяц после эрадикации в кале не выявляются антигены и ДНК микроба. Результат обследования – отрицательный.

В случае выявления антигенов при первичном анализе, врач порекомендует пациенту пройти курс специальной терапии, направленной на уничтожение Н.руlori.

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность - отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования - выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Что представляет собой хеликобактерия?

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Бактерия синтезирует около 20 ферментов

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

• оксидаза,
• уреаза,
• каталаза.

К особенностям микроорганизма относятся:

• сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
• длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
• возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

Агрессивность бактерии является основной причиной атрофической формы хронического гастрита с дальнейшим переходом в язвенную болезнь и раковую опухоль.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

• вздутие живота;
• отрыжка;
• изжога;
• болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
• запоры или поносы;
• чувство тяжести в эпигастрии;
• снижение аппетита;
• резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

• необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
• признаки железодефицитной анемии;
• неясная тромбоцитопения;
• возможность заражения членов семьи;
• контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
• выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Способ бактериологического посева

Выделение культуры возбудителя - микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Среда для посева довольно дорогая, готовится специально

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

• посев должен проходить без доступа кислорода;
• можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
• результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
• анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

По этим причинам использование метода для диагностики ограничено.

Иммунологические способы исследования

Суть иммунологического анализа - выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования - сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант - первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Метод ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Длительность анализа экспресс-методом 5–6 часов, обычным - 2–3 суток

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза - фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

• при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
• желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
• атрофическом поражении слизистой желудка;
• полипах;
• опухолях желудка;
• выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
• контроле за результатами терапии антибиотиками.

• высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
• простоту проведения;
• безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
• возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
• выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

Результат редко выдает ложноположительную информацию при отсутствии инфицированности человека.

Недостатки исследования:

• не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
• нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
• чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
• сравнительно высокая стоимость;
• необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
• положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

ПЦР-лаборатория имеет усовершенствованную технику, позволяющую получить достоверные результаты диагностики

Как оценить результаты анализов?

Расшифровка результатов исследования - дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

• отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
• положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

• выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
• если количество микроорганизмов больше нуля - подтверждается хелибактериоз;
• знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
• R - указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
• I - чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

• 1 степень - наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах - роста нет;
• 2 степень - вырастает до 10 колоний;
• 3 степень - число выросших колоний достигает 100;
• 4 степень - распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Последние две степени считаются наиболее достоверными источниками информации об участии хеликобактер в патологических изменениях желудка.

Тестирование проводят методом иммуноферментного анализа со стандартными сыворотками

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный - при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Как подготовиться к сдаче анализа?

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

• прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
• контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
• некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
• запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
• собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
• непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
• доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Специальный набор для забора кала на анализ можно приобрести в аптеке

Дополнительные исследования

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Проведение иммунологических исследований сыворотки крови может быть порекомендовано в случае необходимости дифференциальной диагностики формы поражения.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

Классификация методов выявления инфекции Нelicobacter pylori представлена в таблице.

Инвазивные методы требуют проведения эндоскопического исследования (ФЭГДС) с биопсией и дальнейшим изучением гастробиоптатов. Неинвазивные методы эндоскопического исследования не требуют.

Гистологический метод

Гистологический метод исследования биоптатов СОЖ - микроскопия окрашенных различными способами (гематоксилин-эозином, по Гимзе, толуидиновым синим, по Вартину-Старри) мазков-отпечатков гастробиоптатов. Этот метод позволяет определить выраженность воспаления СОЖ, наличие атрофии, кишечной метаплазии и наличие (степень обсемененности) НР.

Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест)

Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест) - определение HР по уреазной активности микроорганизма в биоптатах СОЖ. Helicobacter pylori продуцирует уреазу, под влиянием которой происходит гидролиз мочевины с образованием иона аммония. При этом увеличивается рН среды, что можно зафиксировать с помощью изменения цвета индикатора. Гастробиоптаты помещают в раствор, содержащий мочевину и индикатор, изменение цвета которого косвенно свидетельствует о наличии HР.

Молекулярно-генетический метод - ПЦР в биоптате

Молекулярно-генетический метод исследования биоптатов СОЖ с помощью ПЦР позволяет выделять высокопатогенные и низкопатогенные штаммы HР.

Бактериологический метод

Бактериологический метод исследования биоптатов СОЖ: культуральное исследование и определение чувствительности HР к антибиотикам перед терапией первой линии важно проводить в регионах с высокой резистентностью к кларитромицину (более 15-20%), если планируется использовать стандартную трехкомпонентную эрадикационную терапию, одним из компонентов которой является кларитромицин. Бактериологический метод с определением чувствительности к антибиотикам также необходимо применять при неэффективности эрадикационной терапии второй линии.

Исследование кала на наличие антигена HР (ИФА)

ИФА (особенно с применением моноклональных антител) выявления антигена HР в кале является высокочувствительным и специфическим методом как для первичной диагностики инфекции НР, так и для контроля результата лечения.

Серологический метод

Серологический метод (ИФА) - определение антител IgG к HР в сыворотке крови - простой и доступный метод первичного скрининга инфекции. Учитывая, что антитела к HР сохраняются в течение многих месяцев после эрадикации микроорганизма, использование серологического метода не рекомендуется для оценки эффективности проведения эрадикационной терапии.

Уреазный дыхательный тест с 13С-мочевиной

Уреазный дыхательный тест - исследование состава выдыхаемого воздуха после приема раствора мочевины, меченной изотопом углерода (13С). При наличие в желудке обследуемого HР мочевина под действием уреазы, продуцируемой бактерией, подвергается гидролизу до Nh5+ и HCO3- с последующим образованием из HCO3- углекислого газа, который, попадая в кровоток, затем выделяется через легкие и может быть определен спектрометром в выдыхаемом воздухе. Этот тест может использоваться как для первичной диагностики HР, так и для оценки эффективности эрадикации.

На фоне инфекции Helicobacter pylori развиваются такие воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта, как язва желудка или двенадцатиперстной кишки, эрозивный гастрит, гастродуоденит.

Нормы

• Гистологический метод исследования биоптатов СОЖ - в норме патологические изменения не определяются.
• Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест) - в норме тест отрицательный.
• Молекулярно-генетический метод исследования биоптатов СОЖ с помощью ПЦР - в норме результат отрицательный.
• Бактериологический метод исследования биоптатов СОЖ - в норме результат отрицательный.
• ИФА (особенно с применением моноклональных антител) выявления антигена HР в кале - в норме результат отрицательный.
• Серологический метод (ИФА) - в норме результат отрицательный.
• Уреазный дыхательный тест - в норме тест отрицательный.

online-diagnos.ru

Helicobacter pylori (хеликобактериоз), антиген, кал

Описание исследования

Helicobacter pylori - бактерия в форме спирали, которая поражает стенку желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывая атрофический гастрит, язвенную болезнь и злокачественные образования. Около 50-60% населения инфицировано Helicobacter pylori, обычно заражение происходит еще в детстве.Благодаря своей форме Helicobacter pylori способна повреждать защитный слой слизистой оболочки желудка. Бактерия продуцирует фермент уреаза, который способен нейтрализовать соляную кислоту желудка. Таким образом стенка желудка становится восприимчивой к повреждающему действию соляной кислоты и пепсина, что ведет к язвенной болезни желудка или двенадцатиперстной кишки.Helicobacter pylori может действовать непосредственно на клетки желудка, ослабляя защитный механизм и провоцируя воспаление слизистой. Helicobacter pylori способна усиливать секрецию соляной кислоты в желудке, хотя механизм этого процесса не изучен. Путь передачи инфекции - орально-фекальный и бытовой. Заражение обычно происходит от человека к человеку посредством близкого контакта (при поцелуях). Источником инфекции может быть слюна, вода.Часто инфекция может протекать латентно, не вызывая никаких симптомов.Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки практически в 100% случаев ассоциирована с Helicobacter pylori. Антибактериальная терапия, которая направлена на уничтожение бактерии, приводит к полному излечению от язвенной болезни.У 90% страдающих язвенной болезнью желудка обнаруживается Helicobacter pylori. Антибактериальное лечение приводит к рубцеванию язвы в 70-90% случаев. Тяжелое заболевание желудка - аденокарцинома - в 70-90% случаев вызвано инфицированием Helicobacter pylori.В кале инфицированного Helicobacter pylori можно обнаружить антиген бактерии. Через неделю после проявления симптомов активной инфекции количество бактерий в фекалиях сокращается, что снижает диагностическую ценность метода. Отсутствие антигена к хеликобактеру через 4 недели после проведенной терапии говорит об эрадикации Helicobacter pylori.

Данный анализ позволяет определить антиген Helicobacter pylori, возбудителя заболеваний желудка и двенадцатиперсной кишки. Анализ позволяет диагностировать хеликобактерную инфекцию.

Иммуно-ферментный анализ - ИФА

Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!

В норме результат анализа отрицательный, то есть антиген Helicobacter pylori не обнаружен.

• Диагностика Helicobacter pylori
• Оценка эффективности антихеликобактерной терапии

• Инфицирование Helicobacter pylori

• Отсутствие инфицирования Helicobacter pylori.
• При сохранении клинических проявлений заболеваний, ассоциированных с Helicobacter pylori, рекомендуется повторить анализ через 2 недели.

www.analizmarket.ru

Диагностика хронического гастрита типа В (НР)

ГАСТРИТ - воспаление слизистой оболочки желудка, сопровождающееся дистрофическими и некротическими изменениями.

Причины: нарушение качества и режима питания, химические и лекарственные препараты, инфекция, и прежде всего, Helicobacter pylori (HP). В этом случае отмечается лимфоцитарно-плазмоклеточная инфильтрация слизистой оболочки. На начальных стадиях процесс захватывает только антральный отдел желудка, что сохраняет его основные функции. В дальнейшем присоединяются нарушения регенерации и дифференцировки эпителиальных клеток, что приводит к атрофии слизистых и снижению секреторной функции желудка.

(ДИАГНОСТИКУ ХРОНИЧЕСКОГО ГАСТРИТА СМ. ВНИЗУ СТРАНИЦЫ)

количество 4

Диагностика заболевания

название

количество 4

Дополнительные исследования, помогающие уточнить диагноз

название

* - скидка 3% при оформлении заказа на сайте

Основные симптомы: хронический гастрит может протекать бессимптомно, наиболее характерны боли в верхних отделах живота и язвенно-подобный синдром (голодные эпигастральные боли, тошнота, чувство переполнения желудка, тревога, депрессия). Часто хронический гастрит В переходит в язвенную болезнь желудка и 12-перстной кишки. НР, образуя аммиак из мочевины, постоянно защелачивает антральный отдел желудка, что приводит к гиперсекреции гастрина и гиперпродукции соляной кислоты, которая воздействует на слизистую желудка, приводя к образованию эрозий и язвы, В то же время, НР выделяет особые токсические вещества, повреждающие слизистую оболочку желудка. Двойное повреждающее действие вызывает стимуляцию иммунной системы, истощая лимфоцитарное и фагоцитарное звенья иммунитета. Усиленная агрессия в сочетании со снижением защиты слизистых приводит к возникновению хронического гастрита и язвенной болезни, а также к раку и лимфоме желудка. Гастроскопия как диагностический прием с последующим исследованием биоптата для выявления НР может оказаться не достоверной из-за трудностей точного попадания в очаг инфицирования в измененной слизистой оболочки. Поэтому в настоящее время современная диагностика хронического гастрита В осуществляется с обязательным иммунологическим лабораторным исследованием инфекционного агента, т.е. выявления в кале антигена НР, в сыворотке крови - антител к НР, а также нарушений системного и местного иммунитета (иммунограмма и секреторный IgA). Кроме того, играет диагностическую роль и изменение микрофлоры кишечника.

immunotest.ru

Как сделать анализ кала на хеликобактер

Бактерия хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) живет в клетках слизистых тканей желудка и двенадцатиперстной кишки. Некоторые разновидности этого «обитателя» ЖКТ при определенных обстоятельствах способны разрушать здоровые клетки человеческого организма и провоцировать заболевания. Эта бактерия – самая частая причина возникновения гастритов, доуденитов и энтероколитов. Правильное лечение подобных недугов зависит от точного выявления «виновника». Для определения наличия и количества хеликобактерии в организме используется несколько методов, одним из которых является анализ кала или, на языке медицинском, копрограмма.

Виды и механизмы исследований

Анализ кала – самый нетравматичный вариант исследования для пациента в отличие от взятия крови или биопсии. Поэтому он столь распространен в диагностике не только хеликобактерной инфекции, но и других заболеваний, застрагивающих ЖКТ. Предпочтительнее проводить прямой анализ кала на хеликобактер, так как он выявляет непосредственно саму бактерию или ее ДНК, а косвенные методики не столь достоверны.

Выделяют три типа прямого исследования каловых масс:

1. Культуральный анализ.
2. Иммунологический анализ.

Каждый из них имеет свои особенности, критерии нормы и недостатки.

ПЦР

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) относится к молекулярно-генетическим способам диагностики и гарантирует максимальную информативность анализа. Суть такого исследования заключается в выявлении ДНК определенного болезнетворного мирокорганизма, многократном увеличении его численности и последующей идентификации вида.

Чтобы такой анализ был максимально достоверным, необходимо соблюсти несколько условий подготовки:

• не употреблять антибактериальный препараты и другие, схожие по действию медикаменты минимум за 3 суток до сдачи биологического материала;
• также за 3–4 дня до исследования нельзя использовать ректальные свечи, слабительные препараты и другие средства, влияющие на перистальтику ЖКТ;
• за этот же период времени до сдачи анализа не стоит принимать медикаменты и продукты питания, способные изменить окраску кала (препараты железа, свекла и т.д.);
• емкость для биологического материала должны быть стерильной, и доставить ее в лабораторию желательно как можно быстрее.

В среднем, результат ПЦР-исследования будет готов по истечению суток.

Культуральный анализ

Этот вариант относится к микробиологическим методикам исследования и заключается в следующем: взятые биологический материал помещают в специальную среду, которая является благоприятной для роста тех или иных микроорганизмов. По истечению определенного периода времени, который для хеликобактер пилори составляет 7 дней и более, выращенную культуру тщательно изучают под микроскопом. Чтобы определить род микроорганизма с наибольшей вероятностью, ученые используют дополнительные методы: окрашивают культуру специальными красителями, проводят исследования на взаимодействие с другими веществами, изучают способность выявленных бактерий вступать в ту или иную биохимическую реакцию.

Культуральный анализ позволяет не только определить антиген хеликобактер пилори, но и выяснить, к каким антибактериальный препаратам эта бактерия чувствительна. Это обстоятельство становится крайне важным в случае длительного лечения хеликобактерной инфекции и невосприимчивости ее к ранее назначаемым препаратам. Однако к великому сожалению медиков, полученные результаты чувствительности к определенным антибиотикам не всегда совпадают с реальностью, и те медикаменты, которые «сработали» в пробирке, в жизни оказываются бесполезными или недостаточно эффективными.

Иммунологический анализ

Этот вариант исследования основан на способности антител соединяться с антигенами. Для этого на выбранные антитела наносятся специальные метки, которые, слипаясь с антигенами хеликобактерии, формируют целые комплексы. По их количеству и делается вывод о результатах анализа.

Особенность этого исследования – риск получения ложного результата при анализе, биологический материал для которого взят уже после эрадикации. Тест может быть ложноположительным, так как в кале еще могут быть обнаружены бактерии.

Иммунологический анализ в основном назначают до проведения инструментальных методов обследования, если клиническая картина соответствует хеликобактерной инфекции, и имеются характерные симптомы. В случае подозрения на ложноположительный или ложноотрицательный результат проводится дополнительные анализы другими способами.

Роль анализа ПЦР в правильной терапии заболевания, ассоциированного с Helicobacter Pylori

К сожалению, в нашей стране распространенна практика повального использования антибактериальных препаратов. Это приводит к росту числа микроорганизмов, устойчивых даже к самым современным медикаментам, что ставит под угрозу здоровье и жизнь человека при серьезных недугах, требующих интенсивной антибиотикотерапии. Касается это и лечения хеликобактерной инфекции, ведь далеко не все штаммы этой бактерии опасны и не все требуют немедленного «изгнания».

ПЦР-анализ позволяет не только доподлинно выявить бактерию, но и определить ее штамм, что кардинально влияет на тактику лечения и необходимость терапии в целом.

Достоинства этого метода исследования:

• неинвазивность и простота забора биологического материала;
• высокая чувствительность, что сводит риск получения ложного результата к минимуму;
• максимальная информативность;
• безопасность;
• возможность выявления разных видов и штаммов хеликобактерии.

Именно поэтому специалисты все больше и чаще прибегают к методу полимеразной цепной реакции. Однако и недостатки у этого анализа имеются, и одним из самых главных является довольно высокая стоимость, особенно при необходимости генотипирования.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори может проводится разными способами и дополняться другими методами исследования, как лабораторными, так и инструментальными. Выбор конкретного варианта – прерогатива врача, который также расскажет, как правильно сдать биологический материал, оценит результаты исследования и в соответствии с ними подберет адекватную терапию.